免疫测定原理

这些测定的基本原理是抗体 - 抗原反应的特异性。存在几种不同的免疫测定格式(见下文“免疫测定”),但所有这些都涉及与其抗原结合的特异性抗体,以及用于检测抗原抗体复合物的标记。

标签可以与与抗原结合的一抗结合,也可以与与一抗结合的二抗结合,或者与加入到样本中与待测抗原竞争的部分抗原结合。为了将束缚物与自由分数分离,至少需要一个洗涤步骤。实际上,由于免疫测定通常涉及多个洗涤、配药和孵育步骤,分析工作站通常用于自动化流程。

类型的分析

分析了信号

根据所测信号的类型对免疫分析进行分类是一种有用的方法,因为这影响到它的灵敏度和测量它们所需的仪器。最常见的免疫分析方法有:

  • ELISA(酶联免疫吸附试验)如果信号是由一种产生有色底物的酶提供的,用吸光度来测量。它们通常用ELISA读者或者在一个ELISA工作站自动完成整个分析。它们是最常见的免疫分析方法,但ELISA的灵敏度有限,可以通过转向更灵敏的检测方法来改进。
  • FIA(荧光免疫测定)如果信号是由荧光染料(例如FITC)提供;在这种情况下,测量是通过使用微孔板荧光计
  • CLIA(化学发光免疫分析法)如果信号是由催化产生光的反应的酶提供的。它们是用微孔板测量的光度计。发光是一种具有最高灵敏度的检测方法。
  • ria(等)如果信号是由放射性同位素的辐射提供的,例如125由于它们通常是γ -发射同位素,所以通常使用γ计数器。辐射是另一种具有最高灵敏度的探测方法。
  • 新的检测技术也被应用于免疫分析,例如扶轮基金会阿尔法技术

分析的格式

有几种不同的免疫分析格式存在,这取决于什么抗原-抗体复合物形成和信号在哪里被量化。这个术语来自于最常见的免疫分析,ELISA,它们通常被称为各自的ELISA格式:

  • 直接ELISA:被标记的抗体直接与抗原结合。
  • 间接ELISA:标记的抗体与所要研究的抗体结合,该抗体与固定抗原结合。
  • 三明治盟友:感兴趣的抗原被捕获在固定抗体和标记抗体之间。
  • 竞争力的ELISA:样本抗原与抑制剂抗原竞争,与数量有限的标记抗体结合。

你可以在我们的网页上找到更多关于免疫分析格式的信息ELISA格式

的应用分析

免疫分析广泛应用于研究、药物发现和诊断,对分析物进行高特异性和低成本的检测,包括但不限于:

  • 肿瘤标记物,如AFP, CEA, hCG, PSA…
  • 心脏标志物,如CK-MB、CRP、地高辛、肌红蛋白…
  • 基于细胞的分析,例如细胞毒性…
  • 过敏,例如:组胺、鸡蛋、牛奶、allmonds……
  • 生长不足,例如hGH
  • 酶活性
  • 激素及类固醇筛查,如:T4、fT3、TSH…
  • 药物滥用检查,例如安非他命、可卡因、迷幻药…
  • 免疫学检查
  • 传染病,例如衣原体、巨细胞病毒、肝炎、风疹…
  • 兽医,例如细菌感染,生育,毒品,BSE ......
  • 食品和饮料,例如病原体,毒素......
  • 水质分析,例如细菌污染、毒素、重金属…
  • 农业,例如内毒素,杀虫剂…
  • 环境,例如工业化学品,农药,表面活性剂…

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