敏感单位

大多数标仪说明书将其灵敏度表示为一种物质的量,通常是ATP或荧光素酶的量发光荧光素表示荧光。对于其他检测技术,可以是使用该技术的试剂盒检测到的任何其他物质。他们还会使用Femtomole、Attomole和Zeptomole等术语。那么,这些术语是什么意思?

如您所知,Avogadro的号码是摩尔内物质的分子数。它的值为6.022 x 1023.。因此,一摩尔物质由602,250,000,000,000,000,000,000个分子组成:

  • 毫微微镜是1 x 10-15或者说千万亿分之一摩尔(0.000000000000001)这是602,200,000个分子(阿伏伽德罗数X (1 X 10)-15)。
  • 斧头是1 x 10-18这是摩尔(0.0000000000000000000001)的千分之一,是〜602,200分子。
  • Zeptomole是1 × 10-21年也就是一摩尔的十亿分之一(0.00000000000000001),大约602个分子。

从以上可以看出,这意味着我们正在处理极小的数字,特别是在Zeptomole水平。那么,我们如何使用所有这些来评估任何乐器的性能?我们需要考虑两个主要标准:检测(灵敏度)的下限和变异系数。

  • 检测的下限是产生高于空白噪声的仪器响应的最小样本量,并且被称为灵敏度。
  • 变异系数是一组读数随时间变化的百分比——这意味着仪器性能的一致性。

仅使用已知标准获得变异系数和下限。

计算检测下限

我们在Berthold只使用已知标准和以下公式来计算检测限:

用于检测微孔板读卡器的检测限的公式
浓度S. 标准*信号浓度(pg/mL)
方差B. 井中充满空白的标准偏差
的意思是S. 标准*的平均井数
的意思是B. 平均井充满空白

*任何标准点,平均读数至少高于空白的平均读数高出100倍。

由于上面的公式,一个稳定的背景变得非常重要:我们取背景均值的3个标准差,这是> 99%的正态分布。灵敏的仪器会清楚地区分空白噪声和采样信号。看看下面的例子,看看高背景变化的影响:

仪器1 仪器2
的意思是B. 50. 15.
方差B. 10. 15.
浓度S.(pg / ml) One hundred. One hundred.
信号标准 100000年 100000年
信号/噪声 2000年 6,667
计算检测限 0.030 0.045

尽管仪器2具有较低的背景信号,但由于其较高的背景标准偏差,它不太敏感。检测(灵敏度)的下限可以帮助您节省金钱和时间,如果检测到检测限接近检测限为键:一方面,它可以帮助您减少昂贵的试剂或有价值的细胞的消耗;另一方面,您可以显着降低每个样本的阅读时间,并节省有价值的总操作时间。因此,在看敏感度时,仪器中使用的探测器的稳定性非常重要。这就是我们在Berthold手中选择照片乘法器管(PMT)的原因,并在各种温度下测试以下参数,以确保最佳结果:

  • 低噪音,稳定的背景
  • 蓝色/绿色/红色效率
  • 长期稳定性
  • 高检测效率

仅用于常常实验室温度下具有低噪声,稳定背景,高效率和长期稳定性的PMTS用于我们的微孔板读者。这保证了成功研究所需的性能。这使得这使得Centro XS微孔板发光计和三星5.多模阅读器是同类中最灵敏的仪器。